Vegetative propagation of hops (Humulus lupulus L. ): Historical approach and perspectives / Propagação vegetativa do lúpulo (Humulus lupulus L. ): Abordagem histórica e perspectivas

Hop (Humulus lupulus L.) female inflorescences are important raw materials used to produce beers, cosmetics, and medicines. Vegetative propagation is the preferred way of obtaining seedlings for commercial cultivations as female plants produce more lupulin than male plants, a component of commercial interest. It can be carried out by macropropagation (stem cuttings or rhizomes) or micropropagation. This review aimed to systematize different techniques of hop vegetative propagation, with no time frame, from searches in the main academic research bases: Capes Journal Portal, Scielo, Scopus, Web of Science, Science Direct, Google Scholar, and ResearchGate. Most studies are related to micropropagation, mainly addressing different plant regulators and concentrations, as well as types of explants and culture media, strategies to produce virus-free plants, artificial lighting, and cryopreservation. Experiments with stem cuttings are more common regarding macropropagation, but factors such as size and origin of cuttings, rooting period, and the response of different cultivars need to be better evaluated. Cultivation by cuttings allows the production of clones of female plants and micropropagation the production of virus-free clones in a short time and less physical space. Currently, micropropagation has been widely applied to cryopreservation.(AU)

As inflorescências femininas do lúpulo (Humulus lupulus L.) são matérias-primas importantes utilizadas na produção de cervejas, cosméticos e medicamentos. Como as plantas femininas produzem mais lupulina que as masculinas, componente de interesse comercial, a propagação vegetativa é a forma preferencial de obtenção de mudas para os cultivos comerciais. Esta pode ser realizada por macropropagação (estaquia caulinar ou rizomas) ou micropropagação. O objetivo desta revisão foi sistematizar as diferentes técnicas de propagação vegetativa do lúpulo, sem recorte temporal, a partir de buscas nas principais bases de pesquisa acadêmica: Portal de Periódicos Capes, Scielo, Scopus, Web of Science, Science Direct, Google Acadêmico e Research Gate. A maioria dos trabalhos são relacionados à micropropagação, abordando principalmente diferentes reguladores vegetais e concentrações, além de tipos de explantes e meios de cultura, estratégias para produzir plantas livres de vírus, iluminação artificial e criopreservação. Quanto à macropropagação, experimentos com estaquia caulinar são mais comuns, porém fatores precisam ser melhor avaliados tais como tamanho e origem das estacas, período de enraizamento e resposta de diferentes cultivares. O cultivo por estacas permite a produção de clones de plantas femininas e a micropropagação a produção de clones isentos de vírus, em pouco tempo e em menor espaço físico. Atualmente, a micropropagação tem sido muito aplicada à criopreservação.(AU)

Development of the prickly pear cactus Opuntia stricta (Haw.) Haw. (Cactaceae) in vitro in response to the replacement of potassium nitrate for a commercial kno 3 fertilizer / Desenvolvimento da palma Opuntia stricta (Haw.) Haw. (Cactaceae) in vitro em resposta à substituição de nitrato de potássio (P.A.) por fertilizante comercial KNO 3

ABSTRACT: In micropropagation, potassium nitrate (KNO3), an ACS reagent grade chemical, used in the preparation of growing mediums is expensive and its procurement depends on bureaucratic procedures, as it is controlled by the Brazilian Army. This research to assessed the effect of replacing the ACS KNO3 for a commercially available fertilizer (KNO3- based) on the micropropagation of the prickly pear cactus (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv. Elephant Ear. Treatments used six different fertilizer concentrations (0, 0.5, 1, 1.5, 2 and 2.5 g L-1) and a control consisting of 1.9 g L-1 KNO3, as shown in the MS salts. The survival, size and number of sprouts and the value of fresh biomass were evaluated. After seedling acclimation, we assessed the survival, number of sprouts, length, and number of roots, racket formation, average fresh biomass mass, macronutrient absorption and morphological changes of the seedlings. Explants inoculated with fertilizers at concentrations of 0.0; 2.0 and 2.5 g L-¹ did not grow. The response of explants at concentrations of 0.5 and 1.5 g L-1 of the fertilizer were the same as those developed in a KNO3 medium, and at a concentration of 1.0 g L-1, in all variables, the means were higher than those of the control medium. Therefore, it showed the feasibility of using fertilizers in the in vitro cultivation of the prickly pear cactus, which may remove bureaucratic barriers and reduce product costs by 99.12%.

RESUMO: Na micropropagação, o nitrato de potássio (KNO3), reagente puro para análise (P.A.), utilizado no preparo dos meios de cultura, possui custo elevado e a sua aquisição depende de trâmites burocráticos, por se tratar de substância controlada pelo Exército Brasileiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da substituição do KNO3 P.A. por fertilizante comercial (com fonte de KNO3), encontrado livremente no comércio, na micropropagação de palma (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv Orelha de Elefante. Os tratamentos foram de seis concentrações do fertilizante (0; 0,5; 1; 1,5; 2 e 2,5 g L-1) e um controle constituído de 1,9 g L-1 de reagente KNO3, conforme mostrado nos sais MS. Avaliou-se a sobrevivência, tamanho e número de brotações do explante, e o valor da biomassa fresca. Após a aclimatização das mudas avaliou-se a sobrevivência, número de brotações, comprimento da parte aérea, número de raízes, formação da raquete, massa média da biomassa fresca, absorção de macronutrientes e alterações morfológicas das mudas. Os explantes inoculados em meio com fertilizantes nas concentrações de 0,0; 2,0 e 2,5 g L-¹ não se desenvolveram. A resposta dos explantes nas concentrações de 0,5 e 1,5 g L-1 do fertilizante foram iguais aos desenvolvidos em meio contendo KNO3, e na concentração de 1,0 g L-1, em todas as variáveis, as médias foram superiores em relação as do controle. Dessa forma, constatou-se a viabilidade do uso do fertilizante no cultivo in vitro da palma, o que propiciou a eliminação dos entraves burocráticos e redução no custo de 99,12% na compra do produto.

Initial in vitro plant establishment of seeds and nodal segments from bromeliad Acanthostachys strobilacea (Schult. & Schult.f.) Klotzsch differs in respiratory rates and shoot formation / Estabelecimento in vitro inicial de plantas de sementes e segmentos nodais da bromélia Acanthostachys strobilacea (Schult. & Schult.f.) Klotzsch difere em taxas respiratórias e formação de brotos

We aimed to investigate the morphological and respiratory differences during in vitro shoot formation from seeds and nodal segments (NS) of Acanthostachys strobilacea (Schult. & Schult.f.) Klotzsch, due to differences in plants obtained by micropropagation. During 35 days of culture, seeds resulted in full plants 14 days earlier than NS, with longer leaves and more roots. Nevertheless, NS plantlets exhibited shoot multiplication. Peaks in O2 consumption and CO2 release were detected at 7 and 14 days for NS and seeds, respectively, suggesting that initial growth has a high energetic requirement. However, the respiration peak was higher in NS than in seeds, possibly due to high energy consumption required for multiple bud breaks. After peaking, respiration decreased, reaching similar values between propagules by 35 days, indicative of an ongoing increase in photosynthesis in both seed and NS plants, possibly due to shoot growth. In conclusion, the development process of NS plants may affect the energy and respiratory demand differently than in seedlings.

Buscou-se investigar as diferenças morfológicas e respiratórias durante a formação in vitro de brotos a partir de sementes e segmentos nodais (NS) de Acanthostachys strobilacea (Schult. & Schult.f.) Klotzsch, devido às diferenças entre as plantas obtidas pela micropropagação. Durante 35 dias de cultura, as sementes resultaram em plantas completas 14 dias antes do NS, com folhas mais longas e mais raízes. No entanto, as plantas NS exibiram multiplicação de brotos. Picos no consumo de O2 e liberação de CO2 foram detectados aos 7 e 14 dias para NS e sementes, respectivamente, sugerindo que o crescimento inicial tem alta demanda energética. No entanto, o pico de respiração foi maior em NS do que em sementes, possivelmente devido ao alto consumo de energia necessário para as múltiplas quebras de gemas. Após o pico, a respiração diminuiu, atingindo valores semelhantes entre os propágulos aos 35 dias, indicativo de um aumento contínuo da fotossíntese em plantas de sementes e NS, possivelmente devido ao crescimento de brotos. Em conclusão, o processo de desenvolvimento das plantas de NS pode afetar a demanda energética e respiratória de forma diferente daquelas de sementes.

Clonal bamboo production based on in vitro culture / Produção de plantas clonais de bambu a partir do cultivo in vitro

Bamboo species are an alternative for the composition of forest plantations. However, their potential has not been explored due to the hard time in producing large-scale clonal plants. Thus, the aim this work was to evaluate the in vitro establishment, bud multiplication and ex vitro rooting of Bambusa vulgaris. The first experiment tested different systemic and contact fungicide solutions, based on exposure time, during the establishment phase. Established explants were subjected to evaluation of residual fungicide effect on subcultures during the multiplication and elongation phases. The second experiment evaluated the influence of activated carbon on ex vitro survival and on adventitious rooting. Explant immersion in liquid culture medium added with 1.0 mL of fungicide for 120 hours has favored the in vitro establishment and reduced fungal contamination. On the other hand, it favored the shoot emission of shoots per explant during the multiplication phase. Both rooting induction culture medium and mini-incubator system use were effective in enabling adventitious root formation. The presence of activated carbon in the rooting induction culture medium resulted in a higher clonal plant survival rate.

As espécies de bambus são uma alternativa para a composição de plantios florestais. Entretanto, esse potencial não tem sido explorado devido à dificuldade de produção de mudas clonais em larga escala. Assim, objetivo deste trabalho foi avaliar o estabelecimento in vitro, a multiplicação e o enraizamento ex vitro de Bambusa vulgaris. No primeiro experimento foram testadas diferentes soluções de fungicida sistêmico e de contato em relação ao tempo de exposição durante a fase de estabelecimento. Os explantes estabelecidos foram avaliados quanto ao efeito residual do fungicida durante subcultivos nas fases de multiplicação e alongamento. No segundo experimento, foi avaliada a influência do carvão ativado sobre a sobrevivência e enraizamento ex vitro. Durante o estabelecimento in vitro, a imersão de explantes em meio de cultura líquido contendo alíquota de 1,0 mL de fungicida durante 120 horas favoreceu o estabelecimento e reduziu a contaminação fúngica, enquanto na fase de multiplicação, houve o favorecimento da emissão de brotos por explante. O meio de cultura de indução ao enraizamento e uso de sistema de mini-estufim foram efetivos para a formação de raízes adventícias e a presença de carvão ativado resultou em uma maior sobrevivência das mudas clonais.

Conservation of Vriesea flammea L. B. Sm., an endemic Brazilian bromeliad: effects of nutrients and carbon source on plant development / Conservação de Vriesea flammea L. B. Sm., uma bromélia Brasileira endêmica: efeitos dos nutrientes e fonte de carbono sobre o desenvolvimento das plantas

Abstract Bromeliaceae is restricted to the Neotropical region and has a high degree of endemism, which contributes to increased biodiversity because of the diverse morphological characteristics of individuals. In order to develop an in vitro conservation technology to obtain plants for reintroduction, seeds of Vriesea flammea L.B.Sm. were collected, sterilized and germinated in culture medium. The plants obtained were cultured for 180 days in MS medium with different concentrations of mineral nutrients (25 and 50% of nitrogenous salts and macronutrients), and different concentrations of sucrose (20, 30, 40, 50 and 60 g L-1), and then acclimatized for 150 days on commercial substrate. When seeds were sterilized directly, only 4% of them were contaminated, whereas sterilization of capsules resulted in 43.6% contaminated seeds. Germination rates above 80% were recorded. Low concentrations of nitrogenous salts and macronutrients produced greater than 76% survival and promoted greater in vitro plant development than the complete MS medium. The development of the aerial system, root system, fresh mass and photosynthetic pigments were positively related to sucrose concentration in vitro. The highest sucrose concentration also indirectly promoted greater development of the aerial system and fresh mass of acclimatized plants. We established conditions for in vitro cultivation and acclimatization for efficient propagation of V. flammea with a view towards conservation of the species or reestablishment of natural populations.

Resumo Bromeliaceae é restrita à região neotropical, com alto grau de endemismo, que contribui para o aumento da biodiversidade, devido às características morfológicas dos indivíduos. Objetivando desenvolver uma tecnologia in vitro de conservação para obtenção de plantas com vistas à reintrodução, sementes de Vriesea flammea L.B.Sm. foram coletadas, esterilizadas, germinadas em meio de cultura e as plantas obtidas foram cultivadas por 180 dias em meio MS com diferentes concentrações de nutrientes minerais (25 e 50% dos sais nitrogenados e dos macronutrientes), bem como em diferentes concentrações de sacarose (20, 30, 40, 50 e 60 g L-1). Após, as plantas foram aclimatizadas por 150 dias em substrato comercial. Quando da esterilização das sementes, apenas 4% destas contaminaram. Por sua vez, a esterilização de cápsulas resultou em 43,6% de sementes contaminadas. Taxas de germinação superiores a 80% foram registradas. Baixas concentrações dos sais nitrogenados e de macronutrientes proporcionaram sobrevivência superior a 76% e promoveram maior desenvolvimento das plantas in vitro do que o meio MS completo. O desenvolvimento do sistema aéreo, radicular, a massa fresca e pigmentos fotossintéticos apresentaram relação positiva com a concentração de sacarose in vitro. A maior concentração de sacarose também propiciou indiretamente maior desenvolvimento do sistema aéreo e massa fresca das plantas aclimatizadas. Estabelecemos as condições de cultivo in vitro e aclimatização para a eficiente propagação de V. flammea com vistas à conservação da espécie ou reestabelecimento das populações naturais.

Micropropagation of Stevia rebaudiana plants / Micropropagação de plantas de Stevia rebaudiana

ABSTRACT: The aim of the study was to develop optimum composition of plant growth regulators in media for the propagation and rooting of shoots of stevia (Stevia rebaudiana Bertoni) in in vitro cultures. Single-node shoot fragments obtained from plants propagated on MS medium were placed onto media supplemented with: BAP, 2iP and KIN at concentrations: 0.5, 1, 2 and 5 mg∙dm-3, whereas at the rooting stage with addition of: IAA, IBA and NAA at concentrations 1, 2, 4 and 8 mg∙dm-3. The highest number of shoots and leaves was reported for plants propagated on MS medium enriched with 0.5 mg∙dm-3 BAP. The greatest number of the longest roots was developed by stevia on the MS medium enriched with 1 mg∙dm-3 IAA.

RESUMO: O objetivo do estudo foi desenvolver uma composição ótima de reguladores de crescimento em meios para a propagação e enraizamento de brotos de estévia (Stevia rebaudiana Bertoni) em culturas in vitro. Fragmentos de parte aérea obtidos de plantas propagadas em meio MS foram colocados em meio suplementado com: BAP, 2iP e KIN nas concentrações: 0.5, 1, 2 e 5 mg∙dm-3, enquanto no estádio de enraizamento com adição de: IAA, IBA e ANA nas concentrações 1, 2, 4 e 8 mg∙dm-3.O maior número de brotações e folhas foi encontrado para plantas propagadas em meio MS enriquecido com 0.5 mg∙dm-3 de BAP. O maior número de raízes mais longas foi desenvolvido por estévia no meio MS enriquecido com 1 mg∙dm-3 de IAA.

In vitro multiplication of cassava varieties / Multiplicação in vitro de variedades de mandioca / Multiplicación in vitro de variedades de mandioca

The implantation of a model of sustainable development for agriculture can happen with the contribution of the mandiocultura. But for this, culture needs to be strengthened. In vitro propagation is an instrument for this purpose. Micropropagation can provide growers with large quantities of vigorous and healthy cassava seedlings in a short time. The objective of this study was to evaluate the in vitro establishment of four varieties of cassava cultivated in the municipality of Colorado do Oeste, State of Rondônia, popularly known as Arara, Caturra, Cacau Vermelha and Roxinha. For that, an experiment was carried out in the Laboratory of In Vitro Cultivation at the Pole of Technological Innovation of the University of Cruz Alta (UNICRUZ), with a completely randomized design in a 4 x 2 factorial scheme, with 6 replications. The treatments consisted of explants grown in Murashige and Skoog (MS) medium without the presence of growth regulator and MS medium supplemented with of 6-benzylaminopurine (BAP). The results indicate that the mean contamination percentage of the explants was 47.19%, differing among the varieties. The best growth response in culture media, in the multiple comparison of means (Scott-Knott's test, 5%), was obtained with MS medium without BAP addition, with significant difference between varieties. Under the conditions of this experiment, it was evidenced that micropropagation is a viable tool for obtaining varieties of interest, with desired phytosanitary qualities, with varietal and large-scale authenticity.(AU)

A implantação de um modelo de desenvolvimento sustentável para a agricultura pode acontecer com a contribuição da mandiocultura. Mas para isso, a cultura precisa ser fortalecida. A propagação in vitro é um instrumento para este fim. A micropropagação pode proporcionar aos produtores grande quantidade de mudas de mandioca vigorosas e sadias em um curto espaço de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o estabelecimento in vitro de quatro variedades de mandioca cultivadas no município de Colorado do Oeste, Rondônia, popularmente conhecidas como Arara, Caturra, Cacau Vermelha e Roxinha. Para isso, foi realizado um experimento no Laboratório de Cultivo In Vitro no Polo de Inovação Tecnológica da Universidade de Cruz Alta (UNICRUZ), com delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 2, com 6 repetições. Os tratamentos consistiram em explantes cultivados em meio Murashige e Skoog (MS) sem a presença de regulador de crescimento e meio MS suplementado com 6-benzilaminopurina (BAP). Os resultados indicam que a porcentagem média de contaminação dos explantes foi de 47,19%, diferindo entre as variedades. A melhor resposta de crescimento em meios de cultura, na comparação múltipla de médias (teste de Scott-Knott, 5%), foi obtida com meio MS sem adição de BAP, com diferença significativa entre as variedades. Nas condições deste experimento, ficou evidenciado que a micropropagação é uma ferramenta viável para obtenção de variedades de interesse, com qualidades fitossanitárias desejadas, com autenticidade varietal e em larga escala.(AU)

La implantación de un modelo de desarrollo sostenible para la agricultura puede suceder con el aporte de la mandiocultura. Pero, para eso, la cultura necesita ser fortalecida. La propagación in vitro es un instrumento para ese fin. La micropropagación puede proporcionar a los cultivadores grandes cantidades de plántulas de mandioca vigorosas y saludables en poco tiempo. El objetivo de esta investigación ha sido evaluar el establecimiento in vitro de cuatro variedades de mandiocas cultivadas en el municipio de Colorado del Oeste, Rondônia, popularmente conocidas como Arara, Caturra, Cacau Vermelha y Roxinha. Para eso, se realizó un experimento en el Laboratorio de cultivo in vitro en el Polo de Innovación Tecnológica de la Universidad de Cruz Alta (UNICRUZ), con delineamiento completamente casualizado en esquema factorial 4 x 2, con 6 repeticiones. Los tratamientos consistieron en explantes cultivados en medio Murashige y Skoog (MS) sin la presencia de regulador de crecimiento y medio MS suplementado con 6-bencilaminopurina (BAP). Los resultados indican que el porcentaje de contaminación promedio de los explantes fue de 47.19%, diferenciándose entre las variedades. La mejor respuesta de crecimiento en medios de cultivo, en la comparación múltiple de medias (prueba de Scott-Knott, 5%), se obtuvo con medio MS sin adición de BAP, con una diferencia significativa entre las variedades. Bajo las condiciones de este experimento, se evidenció que la micropropagación es una herramienta viable para obtener variedades de interés, con cualidades fitosanitarias deseadas, con autenticidad varietal y de gran escala.(AU)

Kasugamycin on Leifsonia xyli subsp. xyli in the in vitro culture of sugarcane / Efeitos da Kasugamicina em Leifsonia xyli subsp. xyli na cultura in vitro de cana-de-açúcar

ABSTRACT: One of the significant obstacles to the growth of sugarcane production is the infection by phytopathogens, mainly by the bacterium Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx) causal agent of Ratoon stunting disease. Thus, this research aimed to evaluate the effects of kasugamycin on the in vitro growth of sugarcane, as well as its effect on the bacterium Lxx. Explants of strain SP791011 from sugarcane were inoculated in MS culture medium supplemented with the antimicrobial kasugamycin at concentrations of 0.00; 0.87; 1.08; 1.74 and 3.48 mL.L-1, where they remained for 30 days. After this period, the survival rate, shoot number per explant, height of the explants, phytomass, dry phytomass and phytosanitary were evaluated based on the presence of genomic DNA of Lxx. It was verified that the culture in kasugamycin influenced the morphological variables negatively; nevertheless, the antimicrobial did not demonstrate phytotoxicity to the plants. All treatments tested in this experiment were diagnosed as positive, with DNA amplification for Lxx, despite it was observed a reduction in bacterial load, suggesting that kasugamycin at higher doses can be evaluated as an attempt to eliminate the bacterium in the in vitro cultivation of sugarcane.

RESUMO: Um dos maiores entraves para o crescimento da produção de cana-de-açúcar é a infecção por fitopatógenos, principalmente pela bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), agente causal do raquitismo-da-soqueira, doença que mais causa perdas a cultura. Assim, este trabalho teve como objetivo, avaliar os efeitos do antimicrobiano casugamicina sobre o crescimento in vitro, bem como seu efeito sobre a infecção endógena por Lxx em cana-de-açúcar. Explantes da variedade SP791011 de cana-de-açúcar foram inoculados em meio de cultura MS suplementados com o antimicrobiano nas concentrações de 0,00; 0,87; 1,08; 1,74 e 3,48 mL.L-1, em que permaneceram por 30 dias. Após este período, foi avaliada a taxa de sobrevivência, número de brotações por explante, altura dos explantes, fitomassa, fitomassa seca e fitossanidade em relação à presença de DNA genômico de Lxx. Foi verificado que o cultivo em casugamicina influenciou de forma negativa nas variáveis morfológicas, apesar disso, o antimicrobiano não mostrou fitotoxidade às plantas. Todos os tratamentos testados neste experimento foram diagnosticados como positivos, com amplificação de DNA para Lxx, apesar de ter sido observada uma redução na carga bacteriana, sugerindo que a casugamicina em doses superiores pode ser avaliada como alternativa na tentativa de eliminar completamente a bactéria no cultivo in vitro de cana-de-açúcar.

Effects of glutathione supplementation and carbon source duringsomatic embryogenesis of Acca sellowiana (O. Berg) Burret(Myrtaceae) / Efeitos da suplementação de glutationa e fontes de carbono durante a embriogênesesomática de Acca sellowiana (O. Berg) Burret (Myrtaceae)

The present study intended to investigate the effects of different glutathione (GSH) levels (0, 0.1, 0.5 and 1 mM) on the somatic embryogenesis (SE) induction of Acca sellowiana. Besides, we evaluated the effect of different carbon sources (sucrose and maltose) on the somatic embryos conversion. GSH-supplemented treatments resulted in improved SE induction rates (~70%) as compared to the control GSH-free (~35%) after 50 days of culture. The total number of somatic embryos obtained did not differ between treatments, but significant differences were observed for the embryonic stages after 80 days of culture. After 80 days of culture, 0.5 and 1 mM GSH-supplemented treatments showed the largest amount of torpedo-staged somatic embryos. In contrast, treatments supplemented with 0 and 0.1 mM GSH showed equal amounts of somatic embryos at all embryonic stages. These results indicate that GSH accelerates the SE induction process and increases the synchrony of the somatic embryo formation of A. sellowiana. The use of maltose for the somatic embryos conversion, as compared to sucrose, did not influence the conversion rate of normal chlorophyllous somatic embryos, but increased the formation of normal achlorophyllous somatic plantlets. This finding can be attributed to the rapid hydrolysis of sucrose, contributing to an enhanced chlorophyll synthesis.

O presente estudo teve como objetivo investigar o efeito de diferentes níveis de glutationa (GSH) (0, 0,1, 0,5 e 1 mM) na indução da embriogênese somática (ES) de Acca sellowiana. Além disso, avaliamos o efeito de diferentes fontes de carbono (sacarose e maltose) na conversão de embriões somáticos em plântulas. Os tratamentos suplementados com GSH resultaram em melhores taxas de indução de ES (~70%) em comparação com o controle isento de GSH (~35%) após 50 dias de cultivo. Após 80 dias as taxas de indução foram iguais. O número total de embriões somáticos obtidos não diferiu entre os tratamentos, mas diferenças expressivas foram observadas nos estágios embrionários. No dia 80 em cultura, os tratamentos suplementados com 0,5 e 1 mM de GSH mostraram a maior porção de embriões somáticos no estádio torpedo. Diferentemente, tratamentos suplementados com 0 e 0,1 mM de GSH mostraram quantidades iguais de embriões somáticos em todos os estágios embrionários. Estes resultados indicam que o GSH acelera o processo de indução do ES e aumenta a sincronia na formação de embriões somáticos de A. sellowiana. O uso de maltose no meio de cultura de conversão de embriões somáticos, em comparação com a sacarose, não influenciou a taxa de conversão de embriões somáticos clorofílados normais, mas aumentou a formação de plântulas aclorofiladas normais. Esse resultado pode ser atribuído à rápida hidrólise da sacarose, apresentando translocação de plantas mais eficiente e aumento da osmolaridade do meio de cultura, contribuindo para uma síntese melhorada de clorofila.

Ex vitro acclimatization of Hippeastrum reticulatum (Amaryllidaceae) using different substrates / Aclimatização ex vitro de Hippeastrum reticulatum (Amaryllidaceae) em diferentes substratos

ABSTRACT: Hippeastrum spp. are herbaceous species belonging to the family Amaryllidaceae, widely marketed worldwide as indoor plants. Aiming to characterize chemically and physically and to compare five substrates in acclimatization, micropropagated seedlings of Hippeastrum reticulatum var. striatifolium (Herb), with an average of four roots, two leaves and bulbs with a 4.7mm diameter, were transplanted to 50-cell polyethylene trays each containing the following substrates: T1 - vermiculite, T2 - carbonized rice husk (CRH), T3 - commercial (peat + vermiculite + CRH), T4 - coconut fiber, and T5 - composted Pinus bark. After transplantation, the trays were kept for 17 days at a greenhouse with intermittent irrigation by nebulization, and 80 days at a greenhouse on a bench with intermittent irrigation by capillarity. The experimental design was randomized blocks with seven replications and ten seedlings per plot. The acclimatization of seedlings was efficient for the substrates tested despite the differences verified by chemical and physical characterization. The mean survival rate was 96%. However, seedlings acclimatized in the T5 substrate showed a qualitative improvement due to a higher formation of roots, leaves and fresh matter.

RESUMO: Hippeastrum spp. são espécies herbáceas pertencentes à família Amaryllidaceae, muito comercializadas mundialmente como plantas envasadas para ambientes de interior. Objetivando caracterizar química e fisicamente, e comparar cinco substratos na aclimatização, mudas micropropagadas de Hippeastrum reticulatum var. striatifolium (Herb) Herb., com média de quatro raízes, duas folhas e bulbos com 4,7mm de diâmetro, foram transplantadas para bandejas de polietileno com 50 células de 50cm³ cada, contendo os substratos: T1 - vermiculita; T2 - casca de arroz carbonizada (CAC); T3 - comercial (turfa+vermiculita+CAC); T4 - fibra de coco; e, T5 - casca de pinus compostada. Após o transplante as bandejas foram mantidas por 17 dias em casa de vegetação com irrigação intermitente por nebulização, e mais 80 dias em casa de vegetação sobre bancada com irrigação intermitente por capilaridade. O delineamento experimental foi o de blocos casualizados, com sete repetições e dez mudas por parcela. A aclimatização de mudas foi eficiente nos substratos testados, apesar das diferenças obtidas na caracterização química e física, com sobrevivência média de 96%. No entanto, as mudas aclimatizadas no substrato T5 se destacaram qualitativamente, por apresentar maior formação de raízes, folhas e massa da matéria fresca.

Dynamics in global DNA methylation and endogenous polyamine levels during protocorm-like bodies induction of Cattleya tigrina A. Richard / Dinâmica da metilação do DNA global e níveis endógenos de poliaminas durante a indução de estruturas semelhantes a protocormos de Cattleya tigrina A. Richard

Cattleya tigrina is endemic to the Atlantic forest biome and classified as vulnerable in the Red Book of Brazilian Flora. In vitro techniques comprise valuable tools for the conservation of endangered plant species. The aim of the present study was to evaluate the morphological features, global DNA methylation levels and free polyamines during protocorm- like bodies (PLBs) induction of C. tigrina. Along with that, an efficient protocol for in vitro propagation of this species is proposed. The first evidences of PLBs induction in C. tigrina occurred at seven days in culture, starting from the basal portion of the leaf abaxial surface. A hypomethylation marked the beginning of cell differentiation, followed by an increased global DNA methylation at 35 days in culture, coinciding with a subtle change in the structures morphogenetic development. During PLBs induction, putrescine exhibited higher levels as compared to spermidine and spermine, and apparently presents a major role during the PLBs induction in C. tigrina. Due to the apparent secondary PLBs formation, this protocol can represent a highly efficient method for in vitro propagation of this species.

Cattleya tigrina é uma espécie endêmica do bioma Mata Atlântica e classificada como vulnerável no Livro Vermelho da Flora Brasileira. As técnicas in vitro compreendem ferramentas valiosas a serem empregadas na conservação de espécies de plantas ameaçadas. O objetivo do presente estudo foi avaliar as características morfológicas, os níveis globais de metilação do DNA e as poliaminas livres durante a indução de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs). Paralelamente, um protocolo eficiente para a propagação in vitro desta espécie é apresentado. As primeiras evidências de indução de ESPs em C. tigrina foram observadas aos sete dias de cultivo, a partir da porção basal da superfície abaxial da folha. Uma hipometilação foi observada concomitante ao início da diferenciação celular, e um aumento da metilação global do DNA foi encontrada aos 35 dias de cultivo, coincidindo com uma sutil mudança no desenvolvimento morfogenético das estruturas. Durante a indução de ESPs, a putrescina exibiu níveis aumentados em comparação a espermidina e espermina e, aparentemente, apresenta um papel importante durante a indução dessas estruturas em C. tigrina. Devido à aparente formação secundária de ESPs, este protocolo pode representar um método altamente eficiente para a propagação in vitro desta espécie.

Effect of modifying concentrations of calcium and magnesium on in vitro development of banana CV. Prata-Anã (Genomic group AAB) / Efeito da modificação das concentrações de cálcio e magnésio no desenvolvimento in vitro de bananeira CV. Prata-Anã (Grupo genômico AAB)

Research suggests that the development of micropropagated banana plants can be improved by altering nutrient concentrations in the culture medium. The aim of this study was to evaluate the in vitro development of banana plants exposed to varying concentrations of calcium and magnesium sulfate. The shoot tips of banana cv. Prata- Anã were inoculated in flasks (volume, 250 cm3) containing 50 mL of MS culture medium. The culture medium contained varying concentrations of CaCl2 (0, 220, 440, 880 mg L-1) and MgSO4 (0, 185, 370, 740 mg L-1. A completely randomized experimental design was employed, based on a 4 × 4 factorial scheme (four levels of CaCl2 concentration, and four of MgSO4). The MS culture medium containing 880 mg L-1 of CaCl2 but no MgSO4 showed the highest increment in the number of leaves (6.0). The highest number of roots was observed in the absence of CaCl2 and MgSO4 in the medium. Additionally, the shoot length was longer (5.05 cm) when the MS medium was supplemented with 185 mg L-1 of MgSO4. The optimum in vitro development of banana cv. Prata-Anã was obtained when the MS medium was supplemented with 880 mg L-1 of CaCl2 and 370 mg L-1 of MgSO4.

Pesquisas sugerem que o desenvolvimento de plantas de bananeira podem ser melhoradas pela alteração das concentrações no meio de cultura. O objetivo deste estudo foi avaliar o desenvolvimento in vitro de bananeira submetida a diferentes concentrações de cloreto de cálcio e sulfato de magnésio. Ápices caulinares de bananeira cv. Prata-Anã foram inoculados em frascos (volume, 250 cm3) contendo 50 mL de meio de cultura MS. O meio de cultura contendo diferentes concentrações de CaCl2 (0, 220, 440 e 880 mg L-1) e MgSO4 (0, 185, 370, 740 mg L-1). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4 × 4 (quatro concentrações de CaCl2 e quatro de MgSO4). O meio MS contendo 880 mg L-1 de CaCl2 na ausência de MgSO4 proporcionou maior incremento no número de folhas (6,0). Maior número de raiz foi observado na ausência de CaCl2 e MgSO4 no meio. Além disso, maior comprimento de parte aérea (5,05 cm) foi obtido em meio MS suplementado com 185 mg L-1 de MgSO4. O melhor desenvolvimento in vitro de bananeira cv. Prata-Anã foi obtido em meio MS suplementado com 880 mg L-1 de CaCl2 e 370 mg L-1 de MgSO4.

Conservation of Vriesea flammea L.B.Sm., an endemic Brazilian bromeliad: effects of nutrients and carbon source on plant development

Abstract Bromeliaceae is restricted to the Neotropical region and has a high degree of endemism, which contributes to increased biodiversity because of the diverse morphological characteristics of individuals. In order to develop an in vitro conservation technology to obtain plants for reintroduction, seeds of Vriesea flammea L.B.Sm. were collected, sterilized and germinated in culture medium. The plants obtained were cultured for 180 days in MS medium with different concentrations of mineral nutrients (25 and 50% of nitrogenous salts and macronutrients), and different concentrations of sucrose (20, 30, 40, 50 and 60 g L-1), and then acclimatized for 150 days on commercial substrate. When seeds were sterilized directly, only 4% of them were contaminated, whereas sterilization of capsules resulted in 43.6% contaminated seeds. Germination rates above 80% were recorded. Low concentrations of nitrogenous salts and macronutrients produced greater than 76% survival and promoted greater in vitro plant development than the complete MS medium. The development of the aerial system, root system, fresh mass and photosynthetic pigments were positively related to sucrose concentration in vitro. The highest sucrose concentration also indirectly promoted greater development of the aerial system and fresh mass of acclimatized plants. We established conditions for in vitro cultivation and acclimatization for efficient propagation of V. flammea with a view towards conservation of the species or reestablishment of natural populations.

Resumo Bromeliaceae é restrita à região neotropical, com alto grau de endemismo, que contribui para o aumento da biodiversidade, devido às características morfológicas dos indivíduos. Objetivando desenvolver uma tecnologia in vitro de conservação para obtenção de plantas com vistas à reintrodução, sementes de Vriesea flammea L.B.Sm. foram coletadas, esterilizadas, germinadas em meio de cultura e as plantas obtidas foram cultivadas por 180 dias em meio MS com diferentes concentrações de nutrientes minerais (25 e 50% dos sais nitrogenados e dos macronutrientes), bem como em diferentes concentrações de sacarose (20, 30, 40, 50 e 60 g L-1). Após, as plantas foram aclimatizadas por 150 dias em substrato comercial. Quando da esterilização das sementes, apenas 4% destas contaminaram. Por sua vez, a esterilização de cápsulas resultou em 43,6% de sementes contaminadas. Taxas de germinação superiores a 80% foram registradas. Baixas concentrações dos sais nitrogenados e de macronutrientes proporcionaram sobrevivência superior a 76% e promoveram maior desenvolvimento das plantas in vitro do que o meio MS completo. O desenvolvimento do sistema aéreo, radicular, a massa fresca e pigmentos fotossintéticos apresentaram relação positiva com a concentração de sacarose in vitro. A maior concentração de sacarose também propiciou indiretamente maior desenvolvimento do sistema aéreo e massa fresca das plantas aclimatizadas. Estabelecemos as condições de cultivo in vitro e aclimatização para a eficiente propagação de V. flammea com vistas à conservação da espécie ou reestabelecimento das populações naturais.

Flask sealing on in vitro seed germination and morphogenesis of two types of ornamental pepper explants / Tipo de vedação na germinação e na morfogênese in vitro de dois tipos de explante de pimenteira ornamental

ABSTRACT: The influence of flask sealing and explant source on the in vitro morphogenesis of pepper, were evaluated in Capsicum annuum. Seeds were sterilized and inoculated in Murashige and Skoog media supplemented with vitamins, myo-inositol, sucrose, and agar. Gas exchange was evaluated in the germination stage by comparing 3 flask-sealing systems: rigid polypropylene lids (PLs) without vents, PLs with 1 vent, and PLs with 2 vents covered with membranes. In the regeneration stage, cotyledon and hypocotyl segments were transferred to the organogenesis-inducing media, being the different sealing types also tested in a factorial scheme. Photosynthetic pigments, morphological and hystological analyses were conducted for each treatment. Plants maintained in glass flasks capped with vented lids showed more vigorous growth and differentiated anatomical structures. These treatments resulted in taller plants, higher numbers and more expanded leaves, higher fresh and dry weights, and an increase in photosynthetic pigments. Cultivation of C. annuum in flasks with reduced gas exchange was more effective on callus induction. During the regeneration stage, hypocotyls were more effective than cotyledons. Sealing type influenced the morphogenic responses of pepper, demonstrating that an increase in gas exchange has a positive effect on biomass production and acclimatization of the plantlets.

RESUMO: Objetivando avaliar a influência de trocas gasosas e da fonte de explante na morfogênese in vitro de pimenteira ornamental, sementes de Capsicum annuum foram desinfestadas e inoculadas em meio de Murashige e Skoog suplementado com vitaminas, mio-inositol, sacarose e ágar. O efeito das trocas gasosas foi avaliado na fase de germinação, utilizando três tipos de vedações nos frascos: tampas de polipropileno rígido (TPR) sem membrana (controle), TPR com um orifício (10mm de diâmetro) coberto com membrana e TPR com dois orifícios cobertos com membranas permeáveis à gases. Na fase de regeneração, segmentos de hipocótilo e cotilédones foram transferidos para o meio de indução de organogênese e os diferentes tipos de vedação foram novamente testados em esquema fatorial. Análises anatômicas de pigmentos fotossintéticos e de características morfológicas foram realizadas. Plântulas cultivadas em frascos com tampas com membranas apresentaram estruturas anatômicas diferenciadas e mais vigorosas. Esses tratamentos resultaram em plântulas maiores, com folhas mais expandidas, maior número de folhas, maior massa fresca e seca e maior quantidade de pigmentos fotossintéticos. O cultivo de C. annuum em frascos com menores trocas gasosas foi mais eficaz na indução de calos. Durante o estágio de regeneração, hipocótilos foram mais eficazes do que cotilédones. O tipo de vedação influenciou nas respostas morfogênicas em pimenteira, demonstrando que o aumento nas trocas gasosas tem um efeito positivo sobre a produção de biomassa e aclimatização das plântulas.

In vitro establishment of blackberry (Rubus sp.) cultivar 'Xavante' / Estabelecimento in vitro de amoreira preta (Rubus sp.) cultivar 'Xavante'

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the in vitro establishment of 'Xavante' blackberry under different conditions of plant luminosity and concentrations of salts of MS medium. The maintenance of 'Xavante' blackberry plants in the absence of light, with the use of MS medium with salt concentrations of 75% and 100% reduce bacterial contamination and the percentage of explants oxidized and provide the highest percentage of surviving and established explants. The 50% salt dilution in MS medium is not recommended when plants are subjected to the absence of light due to the high percentage of oxidized explants and consequently lower survival and establishment.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar o estabelecimento in vitro de amoreira preta 'Xavante' sob diferentes condições de luminosidade da planta matriz e concentrações de sais do meio MS. A manutenção de plantas matrizes de amoreira preta 'Xavante' na ausência de luz, com a utilização de meio MS nas concentrações de 75% e 100% dos sais, reduzem a contaminação bacteriana e o percentual de explantes oxidados e proporcionam maior percentual de sobrevivência e explantes estabelecidos. Não se recomenda a diluição do meio MS para 50% dos sais quando as plantas forem submetidas à ausência de luz, devido ao alto percentual de explantes oxidados e, consequentemente, baixa sobrevivência e estabelecimento.

Effects of exogenous proline and a natural ventilation system on the in vitro growth of orchids / Efeitos da prolina exógena e sistema de ventilação natural no crescimento in vitro de orquídeas

Micropropagation is an alternative to produce orchid plants in large scale. However, this process presents losses during acclimatization. Exogenous proline use in vitro plant tissue culture can reduce the stress of the plant acclimatization phase. We aimed to verify the growth of orchids in different micropropagation systems with the addition of proline in the culture medium. Cattleya walkeriana plants were obtained from the germination of seeds in culture medium. Seeds were germinated in MS medium, added 20 g. L-1 of sucrose, solidified with 6 g. L-1 of agar and pH adjusted for 5,8. The cultures were incubated in a growth room with temperature of 24 ± 2 0C, under photoperiod of 16 h. After 5 months, 1-cm long seedlings were placed in a culture vessel according to the treatments, which were composed of two micropropagation systems (conventional and natural ventilation) and three proline concentrations (0, 1, and 2 g·L-1). The experiment was carried out in an entirely randomized design consisting of a 2 × 3 factorial, for a total of 6 treatments, each with 5 replicates. The natural ventilation system with the use of proline (1 g·L-1) promoted higher dry mass accumulation and better control of water loss by plants.

A micropropagação é uma alternativa para a produção de plantas de orquídeas em larga escala. Entretanto, este processo apresenta perdas durante a fase de aclimatização. O emprego de prolina exógena na cultura de tecidos vegetais é uma alternativa para reduzir o estresse das plantas na fase de aclimatização. O objetivo da presente pesquisa foi verificar o crescimento de orquídeas em diferentes sistemas de micropropagação com prolina adicionada no meio de cultura. Plantas de Cattleya walkeriana foram obtidas a partir da germinação de sementes em meio de cultura. Sementes foram germinadas em meio MS, adicionado de 20 g. L-1 de sacarose, solidificado com 6 g. L-1 de ágar e pH ajustado para 5,8. Após 5 meses, plântulas com 1 cm de comprimento foram inoculadas nos frascos de cultivo de acordo com os tratamentos, os quais foram compostos por dois sistemas de micropropagação (convencional e ventilação natural) em combinação com prolina (0, 1 e 2 g L-1). O experimento foi conduzido em esquema inteiramente casualizado, constando de um fatorial 2x3, totalizando 6 tratamentos com 5 repetições. O sistema de ventilação natural com o uso de prolina (1 g L-1) promoveu o maior acúmulo de massa seca e melhor controle da perda de água das plantas.

Induction of in vitro shoots of Billbergia euphemiae E. Morren (Bromeliaceae) from leaf explants / Indução in vitro de brotos de Billbergia euphemiae E. Morren (Bromeliaceae) a partir de explantes foliares

Bromeliads are an important group for the maintenance of the Atlantic Forest, with many threatened species due to exacerbated extraction and destruction of their natural habitats. Considering the need of developing protocols for the conservation of these species, the aim of this work was to evaluate the effect of different growth regulators in the in vitro induction of shoots of Billbergia euphemiae. Leaf explants were excised from seedlings derived from in vitro germination and grown on MS medium supplemented with NAA (0, 1 or 2 µM) and BA (0, 2, 4 or 6 µ M) combinations. The evaluation of the number of shoots per explant, shoot length, number of leaves per shoot and longest leaf length average was carried out after 30 and 60 days of culture. The best in vitro responses were observed in the presence of 1 µM NAA after 60 days of culture, which induced the best production of shoots per explant (16.39), as well as the highest rates of shoot length (1.08 cm), number of leaves per shoot (5.00) and the longest leaf length (0.56 cm). This work determined the best conditions for shoot production from leaf explants of B. euphemiae, being the first report on micropropagation of this species.

As bromélias constituem um importante grupo para a manutenção da Floresta Atlântica, com várias espécies ameaçadas de extinção pelo extrativismo exacerbado e a destruição dos habitats naturais. Considerando a necessidade do desenvolvimento de protocolos para a conservação destas espécies, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes reguladores de crescimento na indução de brotos de Billbergia euphemiae. Explantes foliares foram excisados de plântulas derivadas da germinação in vitro e inoculados em meio MS suplementado com combinações de ANA (0, 1 ou 2 µM) e BA (0, 2, 4 ou 6 µM). O número de brotos por explantes, comprimento dos brotos, número médio de folhas por broto e comprimento médio da maior folha foram avaliados após 30 e 60 dias de cultura. As melhores respostas foram observadas na presença de ANA a 1 µM, após 60 dias de cultura, que induziu a maior produção de brotos por explante (16,39), assim como as maiores taxas de comprimento dos brotos (1,08 cm), número médio de folhas por broto (5,00) e comprimento da maior folha (0,56 cm). Este trabalho determinou as melhores condições para produção de brotos de B. euphemiae a partir de explantes foliares, representando o primeiro relato de micropropagação desta espécie.

Meios de cultivo e sacarose no crescimento inicial in vitro de Miltonia flavescens / Culture media and sucrose on initial in vitro growth of Miltonia flavescens

RESUMO: O cultivo in vitro tem sido utilizado para propagação de plantas ornamentais. A escolha do meio de cultivo e a concentração ideal de produtos orgânicos utilizados no enriquecimento dos meios, como a sacarose, são decisivos na elaboração de protocolos. Dessa forma, objetivou-se avaliar o crescimento inicial de Miltonia flavescens, cultivada por 90 e 180 dias, em quatro meios de cultivo com diferentes concentrações de sacarose. Plantas com 12 meses e germinadas in vitro foram cultivadas nos meios MS, MS 1/2, K e VW, cada um deles suplementado com 1,5g L-1 de carvão ativado, 6,5g L-1 de ágar bacteriológico e com 25, 30, 35, 40 e 45g L-1 de sacarose. Aos 90 e 180 dias, foram avaliadas quanto à massa fresca, número de raízes, de folhas e de brotos e quanto ao comprimento da parte aérea e da maior raiz. As maiores médias para número de raízes, comprimento da parte aérea e massa fresca total foram obtidas nas plantas cultivadas por 180 dias em meio MS 1/2, suplementado com 25g L-1 de sacarose. O maior comprimento de raiz foi verificado nas plantas cultivadas por 180 dias em meio MS suplementado com 45g L-1 de sacarose. Já o número de brotos e de folhas não foram influenciados pelas concentrações de sacarose. M. flavescens apresentou maior crescimento da parte aérea e raiz, quando cultivada por 180 dias em meio MS 1/2, suplementado com 25g L-1 de sacarose.

ABSTRACT: The in vitro culture has been widely used for the ornamental plants propagation. The choice of the best medium and organic products concentration, such as sucrose, are decisive in the protocols. Thus, the aim of this study was to evaluate the initial growth of Miltonia flavescens, grown for 90 and 180 days, in four culture media supplemented with different concentrations of sucrose. Plants aged 12 months were germinated in vitro and cultured on MS, MS 1/2 K and VW media each one supplemented with 1.5g L-1 of activated charcoal, 6.5g L-1 bacteriological agar and 25, 30 35, 40 and 45g L-1 sucrose. After 90 and 180 days, fresh mass, number of roots, leaves and shoots, length shoot and the largest root were evaluated. The highest average for number of roots, shoot, length and total fresh weight were obtained in plants grown for 180 days on MS 1/2 medium supplemented with 25g L-1 sucrose. The greater length of roots was observed in plants grown for 180 days on MS medium supplemented with 45g L-1 sucrose. M. flavescens showed higher growth of shoots and roots when cultivated for 180 days on MS 1/2 medium supplemented with 25g L-1 sucrose.

Proline levels, oxidative metabolism and photosynthetic pigments during in vitro growth and acclimatization of Pitcairnia encholirioides L.B. Sm. (Bromeliaceae) / Niveis de prolina, do metabolismo oxidativo e dos pigmentos fotossintéticos durante o crescimento in vitro e aclimatização de Pitcairnia encholirioides L.B. Sm. (Bromeliaceae)

Abstract This study aimed to evaluate the variation in the levels of proline, oxidative metabolism and photosynthetic pigments in plants of Pitcairnia encholirioides grown in vitro under different conditions and after acclimatization. The analyses were performed after 150 days of in vitro cultivation in MS media supplemented with 10 µM GA3 or 0.2 µM NAA, sucrose at 15 or 30 g L–1, in test tubes which allowed gas exchange or in a hermetically sealed system, and 180 days after acclimatization. The in vitro maintenance in hermetically sealed flasks, with GA3 and 15 g L–1 sucrose had adverse metabolic effects, which was demonstrated by the lower proline and photosynthetic pigments accumulation and by the increase in antioxidant enzymes activities. After acclimatization, differences for proline and photosynthetic pigments were no longer found and the enzymatic activities ranged unevenly. The results suggest that the in vitro cultivation in media with 0.2 µM NAA and 30 g L–1 sucrose, in test tubes capped with closures which allowed gas exchange, is more suitable for micropropagation of P. encholirioides, providing a prolonged maintenance of in vitro cultures and plantlets with superior quality for ex vitro development.

Resumo Este trabalho objetivou avaliar a contribuição da prolina, do metabolismo oxidativo e dos pigmentos fotossintéticos na propagação in vitro e aclimatização de Pitcairnia encholirioides, uma bromélia criticamente ameaçada de extinção. As análises foram realizadas após 150 dias de cultivo in vitro em meio MS suplementado com 10 µM de GA3 ou 0,2 µM de ANA, 15 ou 30 g L–1 de sacarose, em tubos de ensaio que permitiam trocas gasosas ou em sistema hermeticamente vedado, e também 180 dias após aclimatização. A manutenção in vitro em frascos hermeticamente fechados, com GA3 e 15 g L–1 de sacarose apresentou efeito metabólico adverso, demonstrado pelo menor acúmulo de prolina e pigmentos fotossintéticos e também pelo aumento das atividades de enzimas antioxidantes. Após aclimatização, as diferenças para prolina e pigmentos fotossintéticos não foram mais encontradas e as atividades enzimáticas variaram de maneira desuniforme. Os resultados sugerem que o cultivo in vitro em meio com 0,2 µM de ANA e 30 g L–1 de sacarose, em tubos fechados com tampas que permitem trocas gasosas, é mais adequado para a micropropagação de P. encholirioides, proporcionando uma manutenção prolongada das culturas in vitro e plântulas com qualidade superior para o desenvolvimento ex vitro.

Antibioticoterapia em microplantas de abacaxizeiro (Ananas comosus) / Antibiotic therapy in Pineapple (Ananas comosus) microplants

RESUMO: Com o intuito de avaliar os efeitos da antibioticoterapia no crescimento de plantas micropropagadas de abacaxizeiros, bem como na comunidade bacteriana endofítica da espécie, realizaram-se análises moleculares. Verificou-se a presença de endófitos no interior das microplantas, mesmo após 30 dias de cultivo em meio de cultura MS, suplementado com diferentes antibióticos, e analisou-se o crescimento da parte aérea e radicular das microplantas. Decorrido o período de 30 dias de cultivo, constatou-se ainda a presença de bactérias endofíticas, no entanto, as microplantas apresentaram acentuada redução no crescimento da parte aérea e radicular, evidenciando assim a influência da microbiota endofítica no crescimento das microplantas in vitro e a importância da manutenção do equilíbrio endofítos/microplanta.

ABSTRACT: This research aimed to evaluate the antibiotic therapy effects in the growing of micropropagated pineapple plants as well as in the community of the endophytic bacterial of the species. It was performed molecular analyzes and verified the presence of endophytes within microplants even after 30 days of culture on MS medium supplemented with different antibiotics and analyzed the development growth of shoots and roots of microplants. After the period of 30 days of cultivation, even being checked the presence of endophytic bacteria, it was verified that the microplants showed reduction of the growing of shoots and roots, thereby demonstrating the influence of in vitro endophytic microorganisms in the development of microplants, and the importance of maintaining it in equilibrium with endophytes/ microplants.